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菌种保藏及活化使用的注意事项

日期2018/5/27 17:58:23 点击?#38382;?nbsp;1519 发布单位天义生物谷  录入李清

菌种保藏的方法很多但原理大同小异首先要挑选优良纯种利用微生物的孢子芽孢及营养体其次根据其生理生化性人为创造低温干燥或缺氧等条件?#31181;?#24494;生物的代谢作用使其生命活动降低到极低的程度或处于休眠状态从而延长菌种生命以及使菌种保持原有的形状防止变异不管采用哪种保藏方法在菌种保存过程中要求不死亡不污染杂菌和不退化

短期斜面保藏

斜面保藏

斜面保藏是目?#30333;?#26222;遍的短期保藏法操作简单使用方便但需定期接种因此工作量较大而且传代?#38382;?#22810;易发生变异因此仅适用于短期经常使用的菌种

1. 配制培养基营养成分浓度稍低为宜特别是糖类尽可能降低产酸菌种则应添加少量碳酸钙

2. 斜面装液量斜面以倾斜后不超过试管长度 1/2 为宜

3. 斜面培养温度较最适稍低时间较最?#20107;?#38271;

4. 生长完成后密封置于 2~8的冰箱中保藏每传代一次霉菌放线菌及有芽孢的细菌可保存 1~3 个月酵母菌 2 个月细菌1个月

活化使用

将斜面从冰箱中取出细菌挑取菌落增菌或霉菌切块传代培养培养好?#32431;?#20351;用

长期冷冻保藏

冷冻保藏

冷冻保藏是目前使用较为广泛的长期保藏法之一适用于所各类微生物较之于斜面保藏减少了工作量延长了保藏时间

1. 准?#24863;?#38754;或平板新鲜培养物一个10%的无菌甘油溶液

2. 用甘油溶液将菌体或孢子洗脱下来形成菌悬液

3. 菌悬液分装冻存管装液 1mL/支后置于程序降温盒

4. 将程序降温盒置于-80冰箱冻存

5. 可保藏 1-2 年

活化使用

1. 将冻存菌株置于冻存盒中取出准?#26438;?#28020;溶解?#24418;?#24120;温融化

2. 将菌株?#26438;?#32622;于水浴速溶细菌 40棬真菌 30棬约 2min 全部溶解后接种到适宜培养基

3. 采用适宜条件培养完成?#32431;?nbsp;

 
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