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原代细胞如何传代接种

日期2018/11/25 15:00:59 点击?#38382;?nbsp;588 发布单位天义生物谷  录入李清

原代培养


当采用外科操作的方法将细胞从有机体中分离下来然后置于合适的培养环境中它们会附着分裂和生长这称为原代培养原代培养有两种基本的方法第一种使用外植块将小片的组织粘附到玻璃或经处理的塑料培养瓶中并浸于培养液中几天之后单个细胞将从组织外植块中移动到培养瓶的表面或基质中开始分裂生长第二种方法也是使用更广泛的方法通过在组织碎片中加入消化蛋白水解酶如胰酶或胶原酶消化成团聚集的细胞从而加快这一步骤得到单细胞的悬液然后将其置于含有培养液的细胞培养瓶内让其继续生长分裂这种方法成为酶解


传代接种


当原代培养瓶中的细胞已经生长且布满了所有可用的培养基质后它们必须进行传代以便为继续生长提供空间这通常需要将细胞尽可能轻柔地从基质上用胰酶消化下来这些酶类似于原代培养中使用的酶它能够打断使细胞粘附到基质?#31995;?#34507;白键有些细胞株可以通过轻轻刮除培养瓶底部的细胞加以收集收集之后将细胞悬液进行进一步的分散并置于新的培养瓶中


当细胞过多?#20445;?#21017;可以用合适的低温保护的试剂如二甲基?#29756;?#25110;甘油进行小心冰?#24120;?#28982;后置于低温环?#24120;?30以下中直到需要再次使用

 
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