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细胞培养易出现的问题解析

日期2018/2/26 17:51:47 点击?#38382;?nbsp;1636 发布单位天义生物谷  录入李清

    摘要做细胞培养的同学如果互相交流会发现不同的实验室有些规则是不一样的初学者经常不知对错今天就和大?#26131;?#32467;一下这些纠结的问题希望对你的细胞之路有所帮助


细胞冷冻管解冻培养时是否应马上去除DMSO


    除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外绝大部分细胞株包括悬浮性细胞在解冻之后应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO ?#32431;ɣ?#22914;此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题


可否使用与原先培养条件不同之培养基


    不能每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基细胞大都无法立即适应造成细胞无法存活


可否使用与原先培养条件不同之血清品牌


    可以但是不能频?#22791;?#25442;血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源血清的种类和?#20998;?#23545;于细胞的生长会产生极大的影响更换不同品牌的血清之初可能细胞会有一个短暂的适应过程适应后好的血清会促进细胞良好生长建议选择合适的放心品牌血清而不是在假货横行的当下选择昂贵的大牌血清因为高价格大品牌是假货的重灾区即使买到正品?#37096;?#23450;造成了资金的浪?#36873;Clark血清致力于打造国内第一放心品牌血清从销售渠道控制革命性外包装反馈跟踪体系和重奖打假四个方面入手开国内先河保证每一瓶都是正品让用户放心


培养基中是否须添加抗生素


    除于特殊?#31174;?#31995;统中外一般正常培养状态下培养基中不应添加任何抗生素


细胞冷冻培养基之成份为何


    动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 %原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混?#29616;?#27880;意?#27827;?#20110;DMSO 稀释时会放出大量热能故不可将DMSO直接加入细胞液中必须使用前先行配制完成 


DMSO之等级和无菌过滤之方式为何


    冷冻保存使用之DMSO等级必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)其本身?#27425;?#26080;菌?#32431;z?#31532;一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中保存于4 C避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质并可减少污染之机会若要过滤DMSO则须使用耐DMSO之Nylon材?#20107;四?/span>

 
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